多種の柑橘果皮が調合されたできたエキスは樹状細胞機能を低下させアレルギー性接触過敏症を弱める

Chi-Chen Lin¹, Yi-Che Chen¹,Michiko Suzawa², Shiming Li³, Chi-Tang Ho³

¹Institute of Biomedical Science, National Chung-Hsing University, Taichung, Taiwan, Republic of China; ²Miyauchi Citrus Research Center, Shigoka-Machi, Takasaki, Gunma, 370-0845, Japan; ³Department of Food Science, Rutgers University, New Brunswick, NJ 08901, USA

Keywords: 柑橘果皮、樹状細胞 (DCs)、T 細胞、接触過敏症

背景: 6種の柑橘果皮エキス（ネーブル、八朔、レモン、夏ダイダイ、宮内伊予かん、薩摩）からなる調合された商品、ゴールドローション (GL) は、当初紫外線から肌を守る為に日本で化粧品として開発された。ゴールドの化学分析では、豊富なフラボノイドの含有が認められた。その合計は少なくとも450 ppmまたは0.45 mg/mLとされPMFの含有量は106 ppmまたは0.1 mg/mLであった。GLには抗炎症や免疫調節効果がある事は証拠で明らかになっているが、我々の知る限りにおいては、免疫組織におけるゴールドローションの細胞状、分子ターゲットは不明である。

目的: この研究では我々は成熟及び先天性及び後天性両方の免疫組織をコントロールする抗原提示細胞である樹状細胞の機能的特性におけるGLの作用を調査した。

Methods: Bone marrow-derived DCs treated with various concentrations of GL for 1 h followed by stimulation with or without 100 ng/mL lipopolysaccharide (LPS) in vitro. The functions of DCs, including cytokine and chemokine production, costimulatory molecules, and antigen-specific T cell activation, were analyzed. To investigate the molecular mechanisms of GL-mediated inhibitory effect of BMDCs maturation, the levels of phosphorylated MAPKs and nuclear NF-κB were also measured. Moreover, contact hypersensitivity (CHS) is a typical dendritic cell mediated T cell-dependent cutaneous immune response to reactive haptens. CHS can be induced by epicutaneous immune sensitization and subsequently challenged with haptens, such as DNFB. We also used this model to examine the in vivo effect of GL on DNFB hapten-loaded, DC-mediated CHS immune responses.

Results: 先ずは試験管中のGLにLPS刺激を受けた骨髄由来樹状細胞をいれると、サイトカイン/ケモカイン及び成熟表面マーカー（CD40, CD80, CD86, MHC class I/II）の発現及び抗原特異T細胞の増殖を刺激する作用が量依存的にダウンレギュレートされた。更にGL はLPSで刺激を受けた樹状細胞のMAPK-JNK、 p38、及び and NF-κB 伝達経路を弱める事が解った。更に200 μL GL経口投与するとDNFB-刺激による耳の腫れを減少させ、耳でCD4陽性 and CD8陽性 T 細胞の浸潤を減少させ、IL-1 beta、 IL-6、 TNF-alpha、 IFN-gamma、や Cc12 （単球誘引ケモカイン）IFN-gamma サイトカイン産生を含む炎症マーカー発現もDNFB(0.2%)負荷をかけたものよりも減少させた。

結論: GLが重要なプロ炎症伝達カスケードに有意に影響を及ぼし、マウス樹状再の表現型（目に見える特徴）及び機能性をいずれも低下させている事が明らかになり慢性炎症や自己免疫疾患に対して魅力のある治療薬剤となりえることがわかった。